武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
4)加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗1体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗1体的来源为抗血1清,包被和酶标用的抗1体1好分别取自不同种属的动物。如应用单克1隆抗1体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗1体一起保温反应,作一步检测。
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1.2.1 抗1体的结构
抗1体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与免疫测定有关的Ig主要为 IgG和IgM。Ig由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig的轻链是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda)两种型别。五类Ig的重链结构不同,这决定了它们的抗原性也不同。IgG和IgM的重链分别称为γ(gamma)链和μ(mu )链。
重链和轻链的 N端的氨基酸排列顺序因各种抗1体而异,称为可变区,分别用VH和VL表示。两者构成抗1体的抗原结合部位,只与相应的抗原决定簇匹配,发生特异性结合,是抗1体专一性结合抗原的结构基础。
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封藏的方法:
封片前应根据材料的大小,选用不同规格的盖玻片。材料透明后,在桌上放一张洁净的吸水纸,将含材料的载玻片从二甲本中取出放在纸上(切片的一面向上),迅速地在切片的中央滴一滴树胶(千万不能待二甲本干燥后再进行),用右手持小镊子轻轻地夹住盖玻片的右侧,稍为倾斜使其左侧与封藏剂接角,然后再缓慢地将盖玻片放下,酶联免疫试剂盒代测,这样就可以减少或避免产生气泡。如胶液不足,可以用玻棒再滴一滴树胶从盖玻片边缘补足。如胶液过多,可在干燥以后用刀刮去,并用纱布蘸二甲本拭去残留的树胶。
染色结果:细胞核被苏1木素染成蓝色,细胞质被伊红染色呈粉红色。
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