KAF ELISA试剂盒地址 默沙克生物科技
武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
1.2.1 抗1体的结构
抗1体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。两者构成抗1体的抗原结合部位,只与相应的抗原决定簇匹配,发生特异性结合,是抗1体专一性结合抗原的结构基础。与免疫测定有关的Ig主要为 IgG和IgM。Ig由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig的轻链是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda)两种型别。五类Ig的重链结构不同,这决定了它们的抗原性也不同。IgG和IgM的重链分别称为γ(gamma)链和μ(mu )链。
重链和轻链的 N端的氨基酸排列顺序因各种抗1体而异,称为可变区,分别用VH和VL表示。两者构成抗1体的抗原结合部位,只与相应的抗原决定簇匹配,发生特异性结合,是抗1体专一性结合抗原的结构基础。
1.3.2 适比例
在恒定量的抗1体中加入递增量的抗原形成抗1体复合物(沉淀)的量见图1-4。曲线的高峰部分是抗原抗1体比例合适的范围,称为等价带(zone ofequivalence)。在2001年修订的欧洲心脏病学会心衰诊疗指南中,已经把脑钠肽作为心衰诊断的工具。在等价带前后分别为抗1体过剩带和抗原过剩带。如果抗原或抗1体极度过剩,则无沉淀物形成,在免疫测定中称为带现象(zone phenomenon)。抗1体过量称为前带(prezone),抗原地过量称为后带(p1ostzone)。在用免疫学方法测定抗原时,应使反应系统中有足够的抗1体量,否则测得的量会小于实际含量,甚至出现假阴性。
1.3.3 特异性
抗原抗1体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗1体的抗原结合位点之间。ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来,得到全世界科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗1体反应具有高度的特异性。例如乙1肝1病毒中的表面抗原( HBsAg)、e抗原(HBeAg)和核心抗1体(HBcAg),随来源于同一病毒,但仅与其相应的抗1体结合,而不与另外两种抗1体反应。抗原抗1体反应的这种特异性使免疫测定能在一非常复杂的蛋白质化合物(例如血1清)中测定某一特定的物质,而不需先分离待检物。
在一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时,过量抗原分别和固相抗1体及酶标抗1体结合,而不再形成'夹心复合物'。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象,此时反应后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准曲线(位于抗1体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同(参见1.3.2,图1-4),如按常法测读,所得结果将低于实际的含量,这种现象被称为钩状效应(hook effect),因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。1.取材切取的组织块不宜太大,以利于固定剂穿透,通常以6mm×6mm×5mm为宜。钩状效应严重时,反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增1高的物质(例如血1清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)时,应注意可测范围的1高值。用高亲和力的单克1隆抗1体制备此类试剂可削弱钩状效应。
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